Логотип журнала "Провизор"








Изучение биодоступности детской лекарственной формы иммуномодулина

Е. С. Кариева, Х. М. Юнусова, Х. У. Алиев

Изменения окружающей среды, связанные с нарушением экологической обстановки, негативно сказываются на здоровье населения, что проявляется в ослаблении иммунной системы и в усилении восприимчивости к различным заболеваниям. Наиболее отрицательно это сказывается на детском организме [1, 2, 3]. В связи с этим разработка детских лекарственных форм иммуностимулирующих препаратов — одна из актуальных задач здравоохранения.

Иммуномодулин, разработанный в Ташкентском НИИ вакцин и сывороток проф. Ф. Ю. Гарибом с соавт.,— является иммуностимулятором природного происхождения и производится из местного сырья [4]. В настоящее время в Ташкентском фармацевтическом институте ведутся исследования по разработке некоторых педиатрических лекарственных форм иммуномодулина, гранул сухого сиропа и назальных капель.

Проявление максимального терапевтического эффекта — одно из основополагающих условий, предъявляемых к разработанным лекарственным формам [5, 6]. Целью наших исследований явилось изучение биодоступности гранул иммуномодулина.

Экспериментальная часть

Для исследований использовали гранулы по 0,01 г, полученные методом влажного гранулирования, с использованием в качестве наполнителей-корригентов — сахара (пропись № 1) и глюкозы (пропись № 2). Биофармацевтические исследования включали эксперименты in vivo и in vitro.

Классическим методом оценки биофармацевтических показателей лекарств в опытах in vitro является метод «вращающаяся корзинка», рекомендуемый ГФ ХI. В результате многочисленных исследований выявлена зависимость скорости растворения лекарственных веществ от ряда факторов, к которым относятся значения рН и объема растворяющей среды, а также скорость вращения самой корзинки.

В предварительных исследованиях для подбора оптимального значения рН растворяющей среды были использованы в качестве нейтральной — вода очищенная, кислой — 0,1 н раствор хлористо-водородной кислоты и щелочной — 0,1 н раствор гидроксида натрия.

Результаты исследований представлены на рис. 1, 2 и 3.

Рисунок 1. Результаты изучения высвобождения действующего вещества в гранулах сухого сиропа иммуномодулина в щелочной среде


Рисунок 2. Результаты изучения высвобождения действующего вещества в гранулах сухого сиропа иммуномодулина в нейтральной среде


Рисунок 3. Результаты изучения высвобождения действующего вещества в гранулах сухого сиропа иммуномодулина в кислой среде

Согласно полученным данным было установлено, что значение рН растворяющей среды не оказывает значительного влияния на интенсивность высвобождения действующего вещества из гранул сухого сиропа иммуномодулина и составляет 65,14 (98,79%) за 45 минут инкубирования. В связи с этим в дальнейших исследованиях в качестве растворяющей среды использовали воду очищенную. Объем растворяющей среды составлял 500 мл.

Следующим фактором, влияющим на скорость высвобождения биоактивных веществ из твердой лекарственной формы, является скорость вращения корзинки. Были проведены исследования по определению оптимальной скорости вращения корзинки для создания «теста растворения». Согласно методике ГФ ХI, определение проводили при скорости вращения 50, 100, 150, 200 об./мин.

Результаты исследований приведены на рис. 4, 5.

Рисунок 4. Результаты изучения влияния скорости вращения корзинки на интенсивность высвобождения иммуномодулина из гранул по прописи № 1


Рисунок 5. Результаты изучения влияния скорости вращения корзинки на интенсивность высвобождения иммуномодулина из гранул по прописи № 2

Согласно полученным данным высвобождение иммуномодулина во всех случаях происходило интенсивно. Например, за 25 минут инкубирования в растворяющую среду переходило от 29,78 до 91,11% действующего вещества во всех сериях эксперимента. По полученным результатам видно, что скорость растворения гранул сухого сиропа иммуномодулина прямо пропорциональна скорости вращения корзинки и зависит от вида использованного наполнителя-корригента. Наиболее быстрый переход действующего вещества в растворяющую среду наблюдался в гранулах с сахаром, а в гранулах, приготовленных с использованием глюкозы, высвобождение иммуномодулина незначительно задерживалось. Об этом свидетельствует следующее: при скорости вращения 150 об./мин за 45 минут в гранулах по прописи № 1 наблюдался практически полный переход действующего вещества в растворяющую среду, в то время как в гранулах по прописи № 2 этот показатель составил до 91,88%.

По результатам проведенных исследований были подобраны следующие режимы исследования скорости высвобождения иммуномодулина из гранул: в качестве растворяющей среды — вода очищенная, объем растворяющей среды — 500 мл, скорость вращения корзинки — 100 об./мин.

Объективную оценку об изменениях, которые претерпевают лекарственные вещества в живом организме, можно получить в исследованиях биологической доступности в опытах in vivo. Данные исследования являются не только завершающей стадией биофармацевтических исследований, но и дают характеристику терапевтической эффективности лекарств.

Учитывая вышеизложенное, биологическую доступность гранул сухого сиропа иммуномодулина определяли по их специфической иммуностимулирующей активности. Данное исследование проводили совместно с доктором мед. наук, заведующим кафедрой фармакологии Ташфарми Алиевым Х. У. и канд. мед. наук, старшим научным сотрудником лаборатории иммунопатологии института Иммунологии АН РУз Алимовой М. Т. С этой целью использовали метод Erne, Nordin (1963), позволяющий определить количество антителообразующих клеток (АОК) в селезенках иммунизированных животных.

Опыты проводили на 30 белых беспородных мышах массой 20-22 г. В качестве антигена использовали эритроциты барана.

Для постановки реакции Erne, Nordin или так называемой реакции локального гемолиза в геле мышей иммунизировали внутрибрюшинным введением 30% взвеси эритроцитов барана в объеме 0,2 мл. Через 4 дня после иммунизации на пике иммунного ответа мышей забивали, извлекали селезенку и проводили реакцию.

Водные растворы гранул сухого сиропа иммуномодулина по прописям № 1, 2 вводили мышам орально в объеме 0,5 мл в день антигенной стимуляции. Контрольная группа мышей получала воду в том же объеме.

Полученные результаты приведены в таблице 1.

Таблица 1

Результаты изучения влияния гранул сухого сиропа иммуномодулина на стимуляцию иммунной системы

Вес селезенки, мг АОК в 0,05 мл Число АОК на селезенку, M ± m Число ядросодержащих клеток в селезенке х 106 Число АОК на 1 х 10 ядросодержащих клеток селезенки, M ± m
Контрольная группа
126 27 5400 6200 ± 461,9 69 78 65,5 ± 3,15
148 28 5600 81 69
135 24 4800 72 67
186 37 7400 118 63
225 38 7600 127 60
180 32 6400 114 56
Гранулы иммуномодулина по прописи № 1
175 70 14500 16300 ± 1476,5
Р < 0,05
ИА = 2,63
100 125 129 ± 8,7
Р < 0,05
ИА = 1,93
210 85 16000 150 116
190 75 18000 110 128
185 77 15600 130 140
210 90 17400 145 135
200 87 18500 150 130
Гранулы иммуномодулина по прописи № 2
200 90 15300 17000 ± 2138
Р < 0,05
ИА = 2,74
125 140 143,3 ± 13,1
Р < 0,05
ИА = 2,15
175 95 16700 120 135
210 100 18550 145 130
170 79 16450 117 150
150 85 14800 95 140
220 101 20220 133 165

Результаты экспериментов показали, что в селезенке мышей контрольной группы накапливалось 6200 ± 461,9 АОК. При пересчете на 1х106 ядросодержащих клеток селезенки количество АОК составляло 65,5 ± 3,15.

В аналогичных условиях исследуемые препараты вызывали увеличение количества АОК. Так, количество АОК составляло для гранул иммуномодулина, приготовленных с использованием сахара (пропись № 1) 16300 ± 1476,5 на селезенку и 129 ± 8,7 на 1 млн ядросодержащих клеток, соответственно. Следовательно, препарат стимулирует АОК соответственно в 2,63 и 1,93 раза. Также при введении гранул иммуномодулина по прописи № 2 отмечается практически одинаковая стимуляция — 17000 ± 2138 (143,3 ± 13,1 на 1 млн клеток селезенки). При этом стимуляция АОК наблюдалась соответственно в 2,74 и 2,15 раза по сравнению с контрольными.

Как видно из таблицы 1, все изученные препараты оказывают выраженное иммуностимулирующее действие на процесс антителообразования у мышей.

Выводы

  1. В результате проведенных исследований был разработан тест растворения для гранул сухого сиропа иммуномодулина.
  2. Проведенные эксперименты по определению иммуностимулирующей активности по методу Erne, Nordin (1963) свидетельствуют о выраженном иммуностимулирующем эффекте предлагаемых детских лекарственных форм иммуномодулина.

Литература

  1. Аральский кризис и медико-социальные проблемы / О. А. Аганиязова, Л. Г. Константинова, Т. Б. Ещанов, А. Б. Курбонов.— Нукус: Билим, 2001.— 116 с.
  2. Вельтищев Ю. Е. Становление и развитие иммунной системы у детей. Иммунная недостаточность. Иммунодиатезы.— М: НИИ педиатрии и хирургии, 1996.— 231 с.
  3. Иммунная система человека и иммуномодуляторы — симпозиум VII Рос. нац. конгресса «Человек и лекарство» // Фарм. вестн.— 2000.— № 16.— С. 4.
  4. Гариб Ф. Ю. Иммуномодулин — новый перспективный иммунокорректор.— Ташкент, 1999.— 18 с.
  5. Борзунов Е. Е., Головкин В. А., Грошовый Г. А. Определение биологической доступности лекарственных средств.— М., 1981.— 14 с.
  6. Age-Ralated Changes in Valproic Acid Binding to Rat Serum Proteins in vitro / Patrica W. Stattum, Allen E. Cato, Yary M. Pollack, et al. // J. Pharm.Sci.— 1996.— № 4.— Vol. 85.— P. 373-376.




© Провизор 1998–2017



Грипп у беременных и кормящих женщин
Актуально о профилактике, тактике и лечении

Грипп. Прививка от гриппа
Нужна ли вакцинация?
















Крем от морщин
Возможен ли эффект?
Лечение миомы матки
Как отличить ангину от фарингита






Журнал СТОМАТОЛОГ



џндекс.Њетрика