Логотип журнала "Провизор"








Т. А. Когет, В. Г. Палий, Л. Б. Сакевич

Метрологическая и микробиологическая характеристика антисептического средства Офтарин

Винницкий государственный медицинский университет им. M. И. Пирогова
Винницкий медицинский колледж им. Д. К. Заболотного
Медицинский научно-производственный центр “Биосан”

В отечественной номенклатуре лекарственных препаратов практически отсутствуют средства, которые бы одновременно обладали противомикробным, симпатомиметическим (сосудосуживающим) и антигистаминным действием. Крайне ограниченное количество лекарственных средств, используемых при инфекционно-воспалительных заболеваниях слизистой носа, задней стенки глотки, небных миндалин, конъюнктивы глаза, и социально-экономическая значимость проблемы является предпосылкой для создания нового местного антисептического и симпатомиметического препарата “Офтарин” в виде капель в нос и глаза.

При закапывании Офтарина одновременно в конъюнктивальный мешок и на слизистую носа вовлекается эффективное нейрососудистое рефлекторное поле, поскольку значительная часть слизистой носа и сосудистой системы глаз снабжается из одного нейрососудистого источника. Симпатический нерв регулирует кровенаполнение внутриглазных сосудов и отток жидкости через шлемов канал и водянистые вены, что приводит к расширению зрачка, понижению внутриглазного давления. Это дает возможность применять Офтарин не только при аллергических конъюнктивитах, но и при первичной (простой) открытоугольной глаукоме.

Целью нашей работы является проведение сравнительного исследования противомикробного действия предложенной композиции Офтарин и капель нафтизина, изготовленных на 2% растворе борной кислоты, а также разработка методов идентификации и количественного определения ингредиентов, входящих в состав предложенного препарата.

Материалы и методы

Для создания новой лекарственной формы нами использованы: антисептик декаметоксин — производное четвертичных аммониевых соединений с широким противомикробным спектром действия [1, 2, 3]; нафтизин — сосудосуживающий симпатомиметик, который оказывает противовоспалительное действие и улучшает носовое дыхание; полиглюкин, который усиливает и пролонгирует действие декаметоксина и нафтизина, а также обладает десенсибилизирующими свойства.

Микробиологическое исследование

Готовили взвесь суточной культуры S. aureus в стерильном изотоническом растворе хлорида натрия, который содержал 1 x 1010, 5 х109, 1 х 109, 5 х 108, 1 х 108, 5 х 107, 1 х 107 и 5 х 106 колониеобразующих единиц в 1 мл. Исследование противомикробной активности Офтарина и нафтизина проводили методом последовательных серийных разведений в жидкой питательной среде по общепринятой методике [4, 5].

Идентификацию декаметоксина проводили по методике А. И. Жебентяева [6], которая основывается на образовании окрашенного комплекса с эозином в присутствии (ПВС) и соляной кислоты.

Нафтизин идентифицировали по характерному УФ-спектру поглощения — в пределах от 250 до 320 нм он имеет максимум поглощения при 272 и 281 нм. Полиглюкин определяли по ГФ Х [8].

Количественное определение декаметоксина проводили методом измерения оптической плотности для монохроматического излучения — спектрофотометрическим методом, а для немонохроматического — фотоколориметрическим методом. Известно, что декаметоксин с эозином, в присутствии поливинилового спирта ПВС в слабокислой среде (рH = 5,0) образует окрашенный комплекс розового цвета, который имеет максимум поглощения при 540 ± 2 нм [6]. Для светофильтра № 6 фотоэлектроколориметра КФК-2МП длина волны, которая отвечает максимуму прохождения, составляет 540 ± 10 нм, т. е. измерение оптической плотности на ФЭК проводят на участке максимального поглощения, что позволяет повысить чувствительность определения.

С целью количественного определения нафтизина использовали спектрофотометрическую методику [7]. Соответствие закону Бугера—Ламберта—Бера для водных растворов нафтизина наблюдается в пределах концентраций 1,2–4,8 мг/100 мл. Относительная погрешность методики определения не превышает 0,6–1%.

Содержание полиглюкина в препарате определяли поляриметрически, принимая во внимание удельное вращение полиглюкина [a] D20 = 199,3°[8], а содержимое натрия хлорида — аргентометрически (по методу Мора).

Результаты. Обсуждение

Результаты проведенного сравнительного исследования эффективности противомикробного действия капель нафтизина и Офтарина по отношению к музейным и клиническим штаммам микроорганизмов приведены в табл. 1.

Анализ приведенных в таблице 1 данных свидетельствует, что препарат нафтизина на 2% растворе борной кислоты не оказывает бактерицидного действия на стафилококк, стрептококк, грибы рода Candida, которые являются потенциальными возбудителями инфекционно-воспалительных заболеваний носоглотки и конъюнктивы глаз.

Таблица 1. Сравнительная противомикробная активность капель нафтизина на 2% борной кислоте и Офтарина
Микроорганизмы Минимальная бактерицидная (фунгицидная) концентрация, мкг/мл Во сколько раз Офтарин превышает активность нафтизина Показатель достоверности отличий, Р
Нафтизин Офтарин
S. aureus 2,35 ± 0,34 2 < 0,005
S. pyogenes 12,5 ± 2,1 12 < 0,05
C. albicans 36,94 ± 7,77 36 < 0,05

Общеизвестной реакции идентификации декаметоксина по ментиловой группе с ванилином и концентрированной серной кислотой мешает полиглюкин. Поэтому декаметоксин определяли качественно по реакции образования перманганата декаметоксина — при извлечении хлороформом он окрашивает хлороформный слой в бледно-фиолетовый цвет.

Идентифицировать полиглюкин по методике, рекомендованной ГФ X, нам не удалось, так как декаметоксин и полиглюкин мешают проведению этой качественной реакции. Поэтому для определения полиглюкина препарат выпаривали в пробирке с 0,2 мл концентрированной соляной кислоты до получения 0,1–0,2 мл жидкости, прибавляли 5 мг резорцина и снова нагревали до кипения — появлялась розовая окраска.

Был проведен сравнительный анализ результатов количественного определения декаметоксина в модельных образцах Офтарина спектрофотометрическим и фотоколориметрическим методами (спектрофотометры СФ-26, СФ-46 и ФЭК КФК-2МП). Полученные результаты приведены в табл. 2.

Таблица 2. Результаты сравнительного количественного определения декаметоксина в модельных образцах Офтарина спектрофотометрическим и фотоколориметрическим методами
Содержание декаметоксина в образце (%) Определено
Спектрофото-
метрическим методом (%)
Абсолютное отклонение (%) Фотоколори-
метрическим методом (%)
Абсолютное отклонение (%)
0,0097 0,00990 +2,06 0,00986 +1,65
0,00924 -4,74 0,00932 -3,92
0,00971 +0,10 0,00960 -1,03
0,0100 0,01023 +2,30 0,01018 +1,80
0,00994 -0,60 0,00990 -1,0
0,00950 -5,0 0,00945 -5,5
0,0110 0,01046 -4,91 0,01055 -4,1
0,01045 -5,0 0,01068 -2,91
0,01122 +2,0 0,01108 +0,72

Как видно из таблицы 2, получены результаты, которые дают возможность проводить количественное определение декаметоксина в видимом свете с использованием как спектрофотометра, так и фотоэлектроколориметра, что позволяет анализировать препарат при отсутствии дорогостоящего спектрофотометра.

Оказалось, что нафтизин при анализе декаметоксина также образует комплекс с эозином в слабокислой среде с максимумом поглощения при 541 нм, который в присутствии полиглюкина батохромно сдвигается приблизительно на 2 нм. В присутствии полиглюкина также наблюдается батохромный сдвиг комплекса декаметоксина с эозином и эти сдвиги суммируются, достигая значений максимума при 545–546 нм. Кроме батохромии в присутствии полиглюкина наблюдается также гиперхромный эффект, особенно выраженный у комплекса декаметоксина с эозином.

Отмечено, что при подкислении раствора оптическая плотность комплекса нафтизина с эозином значительно уменьшается; это позволило проводить определение декаметоксина в Офтарине в среде 0,05 М раствора соляной кислоты. Кроме того, нами рекомендовано приготовление раствора РСЗ Офтарина, содержащего точные навески декаметоксина и нафтизина, на растворе полиглюкина.

Параллельно с исследуемым раствором измеряли оптическую плотность раствора “Б” РСЗ Офтарина, обработанного аналогичным образом; в качестве раствора сравнения при анализе декаметоксина использовали раствор, содержащий полиглюкин, ПВС, эозин и 0,05 М раствор соляной кислоты до отметки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

Что касается количественного определения нафтизина, то в ходе исследований определено, что в присутствии раствора полиглюкина наблюдаются незначительные батохромные сдвиги положений максимумов поглощения препарата при 270 нм и 280 нм на 2 нм и 1 нм соответственно.

Поскольку при 281 нм наблюдается более интенсивное поглощение, чем при 271 нм (в среднем в 1,18 раз), мы определяли содержимое нафтизина в Офтарине при 281 нм.

Параллельное измерение оптических плотностей стандартного водного раствора нафтизина, изготовленного с добавлением раствора полиглюкина, и стандартного раствора Офтарина на полиглюкине показало, что декаметоксин, входящий в состав Офтарина, не мешает спектрофотометрическому определению нафтизина. Это совпадает с нашими исследованиями УФ-спектров поглощения водных растворов декаметоксина, которые показали, что растворы декаметоксина в концентрации 100-200 мкг/мл практически не поглощают УФ-излучение на участке спектра свыше 230 нм.

Содержимое нафтизина и декаметоксина в препарате вычисляли по предложенным математическим формулам.

Метрологические характеристики результатов определений декаметоксина и нафтизина в 5 сериях опытно-производственных образцов приведены в табл. 3.

Таблица 3. Метрологические характеристики методик определения декаметоксина и нафтизина
Определяемые ингредиенты f Х, % S х P, % t, (P, t) D х е, %
Декаметоксин 4 0,0099 2,50 х 10-4 95 2,78 6,95 х 10-3 7,02
4 0,0099 1,396 х 10-4 95 2,78 3,88 х 10-3 3,92
4 0,0100 2,17 х 10-4 95 2,78 6,03 х 10-3 6,03
4 0,0097 2,27 х 10-4 95 2,78 6,31 х 10-3 6,50
4 0,0101 2,43 х 10-4 95 2,78 6,75 х 10-3 6,68
Нафтизин 4 0,0252 6,22 х 10-4 95 2,78 1,73 х 10-3 6,86
4 0,0246 4,78 х 10-4 95 2,78 1,33 х 10-3 5,40
4 0,0248 3,64 х 10-4 95 2,78 1,01 х 10-3 4,08
4 0,0251 5,45 х 10-4 95 2,78 1,54 х 10-3 6,14
4 0,0240 4,15 х 10-4 95 2,78 1,15 х 10-3 4,80

Как видно из табл. 3, относительная погрешность, рассчитанная методом математической статистики для 5 параллельных определений образца одной серии с надежностью Р = 0,95, не превышает 6,86% для нафтизина и 7,02% для декаметоксина.

Выводы

Применение капель Офтарин в оториноларингологии и офтальмологии является перспективным, так как Офтарин обеспечивает комплексное противомикробное, сосудосуживающее, десенсибилизирующее действие, а использование состава с определенной плотностью ведет к пролонгированию действия антисептика и сосудосуживающего препарата.

Разработанные методики идентификации и количественного определения ингредиентов, входящих в состав Офтарина, будут использованы при составлении научно-технической документации на этот препарат

Литература

  1. Палій Г. К., Когет Т. А., Палій В. П. Антисептики у профілактиці і лікуванні інфекцій.— К.: Здоров’я, 1997.— 201 с.
  2. Палій І. Г. Сучасні аспекти профілактичної і терапевтичної антисептики та хіміотерапії // Науково-практичний медичний журнал “Інфекційні хвороби”.— 1995.— № 1.— С. 36–38.
  3. Палій В. Г. Дослідження чутливості збудників гнійної інфекції до антимікробних препаратів // Науково-практичний журнал “Інфекційні хвороби”.— 1997.— № 3.— С. 22–26.
  4. Дмитриева В. С., Семенов С. М. Микробиологический контроль активности антибиотических препаратов. — М.: Медицина, 1965.— 363 с.
  5. Об унификации методов определения чувствительности микроорганизмов к химиотерапевтическим препаратам // Приказ от 13.03.1975 № 250.
  6. Жебентяев А. И. Спектрофотометрическое определение декаметоксина с эозином // Известия вузов СССР сер. Химия й химич. технология.— 1984.— Т. 27, вып. 4.— С. 412–414.
  7. Буряк В. П., Курінна Н. В. Спектрофотометричне визначення нітазолу та нафтизину // Фарм. журн.— № 1.—Т. XXVII.— С. 32–35.
  8. Государственная Фармакопея, 10-е изд.— М.: Медицина, 1968.— 1079 с.




© Провизор 1998–2017



Грипп у беременных и кормящих женщин
Актуально о профилактике, тактике и лечении

Грипп. Прививка от гриппа
Нужна ли вакцинация?
















Крем от морщин
Возможен ли эффект?
Лечение миомы матки
Как отличить ангину от фарингита






Журнал СТОМАТОЛОГ



џндекс.Њетрика