Логотип журнала "Провизор"








Ковалева А. М.

Определение липотропной активности некоторых эфирных масел и их компонентов

Украинская фармацевтическая академия

Проблема поиска веществ, обладающих липотропной активностью, которые стали бы основой препаратов второго поколения, является задачей нашего исследования [2, 4, 9]. Вещества, активизирующие липолитическое действие липазы, могут найти применение в заместительной терапии при заболеваниях поджелудочной железы, печени и желчного пузыря. Вещества, ингибирующие или инактивирующие действие липазы, позволили бы смягчить и предотвратить нежелательные процессы при резком выбросе липазы поджелудочной железой при ряде ее заболеваний, особенно при остром панкреатите. В настоящее время, в случае необходимости активации действия липазы, используют заместительную терапию, препаратов же, обеспечивающих ингибирующее действие, существует очень ограниченное количество. В медицинской практике применяются препараты, содержащие ферменты липазной группы: ораза, солинзим, нигедаза и др. Но до сих пор не выявлены вещества, которые оказывали бы действие на сам фермент, вырабатываемый в организме. В 1997 году на фармацевтическом рынке появился препарат «Ксеникал» фирмы «Roche», обладающий ингибирующей липотропной активностью. Существенным его недостатком является способность увеличивать риск новообразований, несмотря на это, ксеникал признан самым безвредным препаратом для лечения ожирения [4].

В нашем сообщении приводятся результаты исследования липотропной активности эфирных масел мяты, эвкалипта и других растений.

Фармакопейный метод определения липазной активности громоздкий и занимает много времени. Поэтому, для определения липотропной активности полученных субстанций нами использован метод, в основу которого было положено изобретение, защищенное авторским свидетельством [1]. Метод основан на характерной особенности липаз функционировать на поверхности масляной капли: ферментативная реакция протекает на поверхности раздела жир—вода [2]. Оптимальное значение рН для реакции равно 8,0–9,0 [2].

Экспериментальная часть

Из аптечного сырья — листьев мяты перечной, эвкалипта прутовидного, а также плодов гвоздики, аниса и фенхеля были получены эфирные масла методом перегонки с водой. Из масла мяты перечной методом вымораживания был получен l-ментол. Физико-химические свойства полученных веществ отвечали фармакопейным требованиям [5, 3, 4, 7, 8, 9].

20 мг веществ растворяли в 2 мл раствора оливкового масла в эфире концентрации С = 0,005·10–3моль/л или С = 15·10–7 моль/1 мл. Микропипеткой отбирали 0,01 мл полученной смеси, доводили эфиром до 1 мл и наносили на предметное стекло площадью 4 см2 0,1 мл. После испарения эфира на предметное стекло наносили каплю объемом 2 мм3 раствора липазы в буфере с рН = 9 с концентрацией 1,4·10–3 мг/мл (содержание белка в липазе не менее 0,7 мг/мл). Наблюдения за увеличением диаметра капли вели с помощью микроскопа в течение 20 мин., диаметр капли измеряли через каждые 5 мин. Параллельно проводили контрольный опыт в таких же условиях, но без добавления исследуемых веществ. Так как раствор триолеина концентрации 5·10–6 моль/л объемом 0,1 мл на поверхности стекла площадью 4 см2 образует мономолекулярный слой, то скорость растекания капли липазы или увеличение ее диаметра или радиуса (мм/мин.) может служить величиной относительно характеризующей активность липазы. Отношение скорости увеличения реакционной поверхности липазы в слое триолеина с исследуемым веществом к скорости в контрольном опыте может служить величиной, характеризующей липотропную активность самого вещества. Опыты проводили в 5-6 повторностях.

Эфирные масла, содержащие моноциклические монотерпеноиды, ингибируют действие липазы (таблица 1).

Таблица 1. Липотропная активность эфирных масел, содержащих моноциклические монотерпеноиды и группу ароматических терпеноидов
№ п/п Субстанция Kонцентрация БАВ, мг/мл Диаметр капли липазы после нанесения, мм Увеличение радиуса капли липазы в течение 20-ти мин под влиянием веществ, мм Активность липазы под воздействием БАВ, мм/мин Активность липазы в контрольном опыте, мм/мин Ингибирование, на D%
5- 10- 15- 20-

Масла, содержащие моноцикличные терпеноиды

1. Масло мяты перечной 0,1 0,4 4,0 5,5 0,6 0,6 0,8 0,8 1,0 0,8 1,2 0,8 0,030 0,020 0,050 0,050 60 40
2. l-Ментол 0,1 0,4 4,2 4,5 0,2 0,4 0,8 0,4 1,0 0,8 1,2 1,2 0,030 0,030 0,045 0,045 33,33 33,33
3 Эвкалиптовое масло 0,1 0,4 5,0 5,5 0 0,2 0 0,2 0,0 0,2 0,0 0,2 0,000 0,005 0,050 0,050 100 90

Масла, содержащие ароматические терпеноиды

4. Гвоздичное масло 0,1 0,4 3,6 3,0 0 0,2 0 0,3 0,1 0,3 0,1 0,3 0,005 0,015 0,050 0,050 90 70
5. Фенхелевое масло 0,1 0,4 3,6 4,0 0,2 0,2 0,3 0,2 0,4 0,2 0,5 0,2 0,025 0,010 0,050 0,050 50 80
6. Анисовое масло 0,1 0,4 4,5 6,5 0,4 0,1 0,8 0,2 1,2 0,3 1,4 0,3 0,070 0,015 0,050 0,050 Акт. 40 70

Масло мяты в концентрации 0,1 мг/мл уменьшает активность липазы на 60%, в концентрации 0,4 мг/мл — на 40%. Ментол уменьшает активность на 33,33% независимо от концентрации. Масло эвкалипта в концентрации 0,4 мг/мл подавляет активность на 90%,а при концентрации С = 0,1 мг/мл — полностью инактивирует липазу.

Эфирные масла, содержащие группу ароматических терпеноидов в основном ингибируют действие липазы. Гвоздичное масло, содержащее 85% эвгенола, оказывает ингибирующее действие на 90%.Фенхелевое масло, содержащее 60% анетола и 20% бициклического монотерпеноида- фенхона, в концентрации 0,1 мг/мл ингибирует действие липазы на 50%, а в концентрации 0,4 мг/мл — на 80%. По-видимому, при увеличении концентрации усиливается действие фенхона. Анисовое масло, содержащее 80% анетола и 10% метилхавикола, в небольших концентрациях активизирует действие липазы, а в больших — ингибирует ее. В первом случае проявляется резкое активизирующее действие изомера анетола — метилхавикола (эстрагола). Во втором — усиливается влияние минорных компонентов масла: анисового альдегида, анискетона, которые в сумме с анетолом оказывают ингибирующее действие на липазу, подавляя ее активность на 70%. Кинетика действия эфирных масел на липазную активность показана в диаграмме.


Диаграмма 1. Кинетика липазной активности под влиянием веществ и в контрольных опытах
Липаза-М - в контрольном опыте с ментолом

Выводы

  1. Выраженность действия изученных веществ представляет практический интерес для целенаправленного создания препаратов второго поколения с выраженной липотропной активностью. Результаты исследования могут иметь значение для более диференцированного назначения препаратов, содержащих эфирные масла и их компоненты.
  2. Эфирные масла, содержащие моноциклические монотерпеноиды — ментол и цинеол, а также индивидуальный l-ментол оказывают частичное ингибирующее действие на ферментативную активность липазы.
  3. Эфирные масла, содержащие группу ароматических терпеноидов, в основном подавляют действие липазы. Эвгенол, анетол — ингибируют, метилхавикол — активизирует действие липазы.

Литература

  1. А. с. 484223 СССР КЛ ФО 7 G7/00.1975 г. Способ определения липазной активности.
  2. БМЭ. Изд. 3-е. в 30-ти тт.— М.: «Сов. Энциклопедия», 1980.— Т. 13.— С. 509–514.
  3. Государственная фармакопея СССР. 10-е изд.— М.: Медицина, 1968.— 1080 с.
  4. Даниленко В. С., Чубенко А. В., Нижерадзе Т. И.//Фармакологический вестник/Анализ динамики исследований по созданию новых лекарственных средств в развитых странах.— 1998.— № 2.— С. 24–36.
  5. Масло анисовое. ФС-67/554/106.
  6. Масло мяты перечной. ФС-67/554/112.
  7. Масло фенхелевое. ФС-67/554/114.
  8. Масло эвкалиптовое. ФС-67/554/116.
  9. Машковский М. Д. Лекарственные средства.— М.: Медицина.— Т. II.— С. 112–122.
  10. Муравьева Д. А. Тропические и субтропические лекарственные растения-2-е изд., перераб. и доп.— М.: Медицина, 1983.— 336 с.
  11. Inse J. et al.//Scand. J. Gastroenterol.— 1980.— № 2/Vol. 15.— P. 137–144.
  12. Lankisch P. G., Creutzfeldt W.//Clin. Gastroenterol.— 1984.— № 3.— Vol. 13.— P. 985–999.




© Провизор 1998–2017



Грипп у беременных и кормящих женщин
Актуально о профилактике, тактике и лечении

Грипп. Прививка от гриппа
Нужна ли вакцинация?
















Крем от морщин
Возможен ли эффект?
Лечение миомы матки
Как отличить ангину от фарингита






Журнал СТОМАТОЛОГ



џндекс.Њетрика