|
А. В. Шовковый, А. Т. Шеин Исследование состава биологически активного природного вещества эсцинГосударственный научный центр лекарственных средств, г. Харьков Настои и отвары из коры, листьев и плодов конского каштана (Aesculus Hippocastanum L.) с давних пор используются в народной медицине в качестве вяжущих, желчегонных средств [14], а также для лечения церебральных функциональных нарушений, вызванных отеками головного мозга, тяжелыми травматическими отеками после перелома, при профилактике и терапии постоперационных отеков, болевых синдромах позвоночника [3]. Разные части растения содержат в тех или иных количествах тритерпеновые гликозиды (эсцин), флавоноиды (рутин, кварцетин) и другие природные соединения [4]. Основным биологически активным веществом, входящим в состав плодов конского каштана, является эсцин [6]. Эсцин представляет собой смесь изомеров: a-, b-эсцина и криптоэсцина [13],— причем основным компонентом, определяющим биологическое действие эсцина, является b-эсцин. Поэтому определенный интерес представляет рассмотрение количественного состава различных промышленных образцов эсцина разных годов выпуска для выяснения количественного содержания b-эсцина в образцах. В литературе описано несколько методов суммарного определения тритерпеновых гликозидов эсцина: потенциометрическое титрование [1]; спектрофотометрические методы, основанные на получении окрашенных продуктов с концентрированной серной кислотой [5], с хлоридом железа (III) [11], с хлоридом кобальта (II) [7, 8]. Описан также и колориметрический метод определения эсцина [9, 10]. Однако все эти методы не дают информации по отдельным компонентам вещества. Цель работы — оценка качественного и количественного состава биологически активного природного вещества эсцин. Для проведения исследования был выбран метод ВЭЖХ. Взяв за основу работу [12], в которой проведено исследование эсцина методом ВЭЖХ, нами были исследованы четыре серии эсцина производства ОАО «Галичфарм», полученного из различных партий конского каштана. Точную навеску эсцина растворяли в метаноле, чтобы концентрация составляла 1 мг/мл. Полученный раствор хроматографировали на жидкостном хроматографе в следующих условиях: колонка размером 3,9х150 мм, заполненная сорбентом Symmetry C18, с размером частиц 5мкм; детектирование при длине волны 210 нм; объем вводимой пробы 10 мкл; скорость подвижной фазы 1,0 мл/мин.; подвижная фаза ацетонитрил — раствор кислоты ортофосфорной (35:65); температура колонки — 250С. Приготовление подвижной фазы. 350 мл ацетонитрила помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл прибавляют 600 мл воды, 10 мл 0,1 М раствора кислоты ортофосфорной, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Оборудование: жидкостный хроматограф фирмы Waters, состоящий из Waters 515 HPLC Pump, Waters 717 plus Autosampler, Waters 2487 Absorbence Detector. Реактивы: Ацетонитрил для ВЭЖХ (ТУ 88-0205-091-002-94), спирт метиловый фармакопейного достоинства [2]. В результате измерений для каждого образца эсцина были получены хроматограммы. Результаты измерений представлены в таблице 1, где сопоставлены относительные площади полученных пиков.
За 100 % принята сумма пиков 1-14, полученных на хроматограмме Как видно из приведенных в таблице значений, во всех сериях наблюдалось наличие пиков 1–9 и 13, 14. Пики 10 и 11 в серии 111090 и 11, 12 в серии 010598 идентифицировать по отдельности не удалось, поэтому представлены их суммарные площади, пик 12 в серии 010597 не обнаружен. Проведенные ранее исследования [12] показали, что b-эсцину принадлежат пики 5, 6, 7, 8. Расчет суммы этих пиков по отношению к сумме всех пиков, полученных в результате хроматографирования эсцина,— 100%, что свидетельствует о содержании в серии 111090 b-эсцина в количестве 79,29%, в серии 020796 — 76,37%, в серии 010297 — 77,55%, в серии 010598 — 76,35%. Из приведенных значений видно, что содержание b-эсцина в зависимости от серии изменяется незначительно — от 76,35% до 79,29% — и в среднем составляет 77,39%. Статистическая обработка результатов эксперимента представлена в таблице 2.
*расчет проведен по 3 значениям; На основании величины относительного стандартного отклонения эксперимента (e), рассчитанной для четырех серий по каждому из пиков, была проведена оценка постоянства состава эсцина каждой серии. Как видно из представленных в таблице значений, для характерных b-эсцину пиков относительные стандартные отклонения результатов находятся в интервале 3,4–11,6%. На наш взгляд, эти результаты можно считать вполне приемлемыми по отношению к значениям стандартного отклонения других пиков, минимальное из которых составляет 20,2% для пика 9, а максимальное — 626,1% для пика 12. Эти данные еще раз подтверждают, что содержание b-эсцина в субстанции эсцина от серии к серии остается практически неизменным. Выводы
Литература
© Провизор 1998–2022
|
Грипп. Прививка от гриппа
Нужна ли вакцинация?
Как и чем лечить кашель?
Безрецептурные лекарства при сухом и влажном кашле Устойчивость микробов к антибиотикам →
Помогает ли одежда из шелка лечить экзему?
Что лучше развивает ребёнка — книжки с картинками или с текстом? О безопасности автокресел для детей в возрасте от 4 до 12 лет
Аллергический ринит
Забеременеть в 40 Лечение бесплодия. Обзор существующих вариантов Аденома простаты. Как и чем лечить ? |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|